Indholdsfortegnelse
Formål:
Hypotese:
Teori:
Resultater (billeder):
Fejlkilder:
Diskussion:
Konklusion:

Optimer dit sprog - Læs vores guide og scor topkarakter

Uddrag
Formål:
Formålet med forsøget er at overføre pGLO plasmidet over i en E.coli bakterie, og pode fire petriskåle med henholdsvis LB (bakteriel vækstmedie), LB/amp (ampicillin) - første to er med helt normale e.Coli bakterier, LB/amp -, LB/amp/ara (arabiose) - de sidste to med e.Coli bakterier transformeret med pGLO.

Hypotese:
Vores hypotese indeholder, forventningen om at de pGLO-transformerede bakterier vokser på et vækstmedie tilsat ampicillin, og kun lyser grønt under UV-lys, hvis der også er tilsat arabinose, da det aktiverer GFP-genet.

Teori:
pGLO transformation forsøget, handler overordnet set, om at tage et gensplejset plasmid og transformere et bakterie med det gennem elektrisk chok

hvor plasmidet derfra får en plads i bakteriet og så kan vise sine egenskaber i bakteriet efter de proteiner som er blevet dannet.

I dette forsøg havde vi at gøre med E.coli bakterier, som vi ville transformere med et grønt fluorescerende protein, som er et protein, som lyser grønt under UV-lys.

Traditionelt forekommet proteinet fra en vandmand art, kaldet Aequorea victoria. Måden GFP skulle overføres til bakteriet, var gennem transformation, så man overfører altså et genetisk materiale fra en organisme, til en anden organisme, dette er gensplejsning, og sker ved hjælp af DNA.

DNA er arvemateriale, og molekyler, som informerer celler om hvordan de skal bygge proteiner. I eukaryote celler er arvematerialet, noget man finder i cellekernen, som kromosomer.

I bakterier, som er prokayote celler, flyder arvematerialet rundt i cytoplasmaet, som DNA-ringe også kaldet plasmider.

Vektorerne altså plasmiderne er DNA, som også virker som vektorer, da de kan overføres direkte fra en celle til en anden. Måden at transformationen virker på, og plasmidets rolle starter alt sammen først med et donor-DNA.

Donor-DNA’et er oprenset DNA, som vi har fra en donorcelle. Her er donorcellen, den organisme vi har udvundet GFP genet fra, altså en vandmand.

Donor-DNA lyseres og centrifugeres herefter, da man helst skal få alle celleresterne væk og kun nøjes med DNA’et. Genet, som koder for GFP proteinet, skal isoleres.