Indholdsfortegnelse
• Oprensning af DNA
• Opformering af DNA (PCR)
• Gel-elektroforese
• Genetisk fingeraftryk og brugen af forskellige metoder i forbindelse med kriminalsager
Optimer dit sprog - Læs vores guide og scor topkarakter
Uddrag
• Oprensning af DNA
DNA er opbygget af fire baser, adenin, thymin, cytosin og guanin, der normalt blot omtales A, T, C og G.
DNA har en form som en snoet trappe, en såkaldt helix-struktur. Men hvordan ser DNA ud for det blotte øje? Det finder man ud af ved at oprense DNA’et.
DNA kan oprenses for alle former af organismer ved hjælp af forskellige metoder. Det oprensede DNA kan efterfølgende analyseres ved hjælp af teknikker som PCR eller gel-elektroforese (se nedenstående spørgsmål).
Når DNA skal oprenses kan man eksempelvis oprense DNA fra et løg eller en kiwifrugt. Isoleringen af DNA fra celler er første trin i mange molekylærbiologiske undersøgelser. Princippet i metoden er som følgende:
• Materialet nedbrydes mekanisk til mindre dele, dvs. at man skærer eksempelvis et løg i små stykker.
• Herefter nedbryder man cellens membraner og kernemembraner ved hjælp af en detergent, der opløser fedtmembraner.
• Der tilsættes specielle enzymer (proteaser), der kan løsne DNA fra histonerne, som DNA’et er viklet op omkring.
• DNA’et opvarmes for at ødelægge enzymer, som findes i cellen, og som kan nedbryde DNA.
- Ved opvarmning af DNA’et nedbrydes celle- og kernemembranerne. Opvaskemidlet bindes til cellemembranernes fedtstoffer og proteiner, og sørger for, at de ikke længere kan opretholde deres funktion som en del af cellemembranen.
Na+ ionerne fra saltet binder sig til DNAs negativt ladede phosphatgrupper, og når DNA-molekylet bliver uladet, kan det ikke så let opløses i væsken
og det er derfor nemmere for os, at få fat i. (Ved 60 grader ødelægges de enzymer som findes i celle, og som kan nedbryde DNA).
• Vævet ødelægges herefter mekanisk ved at blende det.
- Blendning nedbryder cellevægge og membraner yderligere, hvorved DNA frigøres fra kernen/cellen.
Skriv et svar